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  • Columnas Analíticas Interchim

    (U)HPLC y LC-Prep

Columnas Advion Interchim Scientific para moléculas pequeñas puriFlash®

Interchim introdujo su primera fase puriFlash® en 2001 con el objetivo de ofrecer una fase estacionaria con la alta capacidad de carga requerida para purificaciones rápidas por Cromatografía FLASH. Interchim también fue pionera en ofrecer este tipo de columnas de baja presión basadas en sílice de partícula esférica con notables mejoras en cuanto eficacia y velocidad frente a las tradicionales de partícula irregular.

A medida que las demandas de purificación se hacían más estrictas Interchim revolucionó las Técnicas de Purificación Flash introdujo introduciendo fases con partícula esférica de 30 y 15 μm en 2012 bajo el concepto UPFP (Ultra Performance Flash Purification) que todavía no ha podido ser imitado.

La Purificación Flash ha evolucionado en paralelo a HPLC.

  • Cromatografía de Líquidos analítica (HPLC) ha tendido hacia el uso de partículas esféricas más pequeñas (2.2, 1.9, 1.7, 1.5 μm) para mejorar la eficacia y la velocidad (mayores presiones hasta 1500 bar)
  • Cromatografía de Líquidos FLASH (FLASH LC y LC-Prep) ha tendido hacia el uso de partículas esféricas más pequeñas (15 μm en FLASH, 3 y 2.6 μm en LC-Prep) también para mejorar la eficacia y la velocidad (mayores presiones de hasta 50 bar en FLASH, 400 bar en LC-Prep)

La necesidad de poder efectuar una transferencia rápida de métodos analíticos a métodos preparativos de un modo simple e inmediato para el químico orgánico ha sido la base de la creación de puriFlash® C18-HP, puriFlash® C18-XS y puriFlash® C18-AQ, fases estacionarias que se pueden suministrar tanto en formato FLASH y LC-Prep como en formato HPLC.

¡Ahora las transposiciones y el escalado de HPLC a Flash o LC-Prep son todavía más fáciles!

La relación científica de trabajo con LETIAM (Laboratoire d’Études de Techniques Instrumentales d’Analyse Moleculaire) ha influenciado el desarrollo de estas nuevas fases estacionarias de Interchim. LETIAM resulta citado globalmente como proveedor de conocimiento en HPLC, en particular en la caracterización de los sorbentes basados en sílice, y ha desarrollado un método simple y rápido basado en el análisis de pigmentos carotenoides para comparar los tres criterios principales de una fase estacionaria:

  • Hidrofobicidad (relacionada con el contenido de carbono)
  • Reconocimiento de Forma (que depende de la densidad de enlace, tipo de enlace y área superficial específica)
  • Accesibilidad de Interacción Polar (que depende de la sílice de base, bloqueo terminal, o el tipo de enlace C18)

Las fases C18 puriFlash® han sido desarrolladas para cumplir con los criterios definidos por este test que será discutido con mayor profundidad en la parte de Desarrollo de Métodos de HPLC. Las colaboraciones con otros laboratorios han ayudado en el ajuste del desarrollo de fases y han mejorado la precisión y las posibilidades de estas químicas.

Las fases estacionarias puriFlash® se basan en la sílice Upti-prep de 100Å.
Interchim adopta cuatro procesos principales para la síntesis de su gama de fases estacionarias:

  • Mono Funcional + Bloqueo Terminal de una etapa
  • Mono Funcional + Bloqueo Terminal de múltiples etapas
  • Mono Funcional + Bloqueo Terminal Mixto
  • Polifuncional + Bloqueo Terminal de una etapa

El Modelo Único de Clasificación de Fases Estacionarias de Advion Interchim Scientific

Advion Interchim Scientific y sus socios científicos han trabajado para resolver la pregunta esencial de todas las personas que realizan cromatografía líquida: la selección de la columna.

Considerando que:

más de 800 columnas RPLC están disponibles en el mercado.

  • 2 químicas de sílice similares pueden llevar a resultados cromatográficos diferentes.
  • 2 químicas de sílice diferentes pueden llevar a resultados cromatográficos similares.

Para alcanzar rápidamente un objetivo en cromatografía líquida, es muy difícil seleccionar de manera independiente la fase estacionaria adecuada por aplicación sin tener conocimiento del comportamiento de las fases estacionarias.

El Modelo Único de Clasificación de Fases Estacionarias de Advion Interchim Scientific es una herramienta valiosa para todas las personas que trabajan en cromatografía líquida.

a. Fases estacionarias incluidas en nuestra clasificación

  • 300 fases estacionarias representativas de RPLC del mercado actual
  • Sílice porosa o Core Shell
  • Tamaños de partículas de 1.7 a 15µm

b. Desarrollo del modelo para la clasificación de fases estacionarias

A partir de todas las pruebas cromatográficas anteriores, los científicos de AIS:

  • Identificaron los criterios principales que definen el comportamiento de cada fase estacionaria mediante una correlación estadística.
  • Crearon un modelo estadístico que clasifica las fases estacionarias por «similitud» y «ortogonalidad.»
  • Las fases estacionarias que están cercanas en la clasificación se comparan entre sí gracias a su representación visual que caracteriza su selectividad.

c. Verificación experimental del modelo estadístico

Las verificaciones experimentales confirman la precisión del método de clasificación para varias familias de analitos.

d. Representación visual de la fase estacionaria

Conclusión

Durante 30 años, Interchim ha trabajado con numerosos equipos de investigación universitarios, especialmente con el laboratorio de Química Analítica de París-Sur. Nuestro objetivo común, más allá del conocimiento detallado del comportamiento de las fases estacionarias para la cromatografía líquida, es ofrecer a los analistas las herramientas que permitan una selección relevante de columnas.

Hemos probado más de 300 fases estacionarias para cromatografía líquida en fase reversa entre las sílices totalmente porosas de 1,7 a 15 micras y las sílices superficialmente porosas.

La construcción de nuestro modelo de clasificación de fases estacionarias ha permitido desarrollar diversas herramientas que facilitan el desarrollo analítico de los clientes y su trabajo diario gracias a:

  • Proponer alternativas a sus columnas actuales:
    • Transferencia de HPLC a UHPLC
    • Transferencia de HPLC a purificación
    • En caso de un problema de separación
  • Proponer alternativas ortogonales:
    • Cuando las columnas actuales no tienen éxito el nuevo desarrollo
    • Para optimizar métodos existentes
    • Para mejorar la separación de un par crítico

Las gamas de columnas Uptisphere® CS Evolution™, Uptisphere® Strategy™, Uptisphere® 120 Å, puriflash®, puriflash® BIO y Uptisphere® BIO de Advion Interchim Scientific proporcionan soluciones efectivas para los métodos analíticos actuales.

Ejemplo del Modelo Único de Clasificación de Fases Estacionarias de Advion Interchim para obtener fases estacionarias alternativas

El modelo muestra que las fases estacionarias con representaciones visuales similares son similares en términos de selectividad, mientras que las químicas y las bases de sílice son diferentes.

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  • Columnas Analíticas Interchim

    (U)HPLC y LC-Prep

Columnas de Interacción Superficial Advion Interchim Scientific para moléculas pequeñas Uptisphere®  StrategyTM C18-3, C18 HQ y C18 RP

Las fases C18 Uptisphere y Uptisphere Strategy han sido desarrolladas para cumplir con los criterios definidos por este test que será discutido con mayor profundidad en la parte de Desarrollo de Métodos de HPLC.

Las colaboraciones con otros laboratorios han ayudado en el ajuste del desarrollo de fases y han mejorado la precisión y las posibilidades de estas químicas.

Las fases estacionarias Uptisphere se basan en la sílice Upti-prep de 120Å.

Las fases últimamente desarrolladas de la serie Uptisphere Strategy se basan en la sílice Upti-prep de 100Å.

Interchim adopta cuatro procesos principales para la síntesis de su gama de fases estacionarias:

  • Mono Funcional + Bloqueo Terminal de una etapa
  • Mono Funcional + Bloqueo Terminal de múltiples etapas
  • Mono Funcional + Bloqueo Terminal Mixto
  • Polifuncional + Bloqueo Terminal de una etapa
Uptisphere® Strategy™ C18-3

La alta densidad del enlace C18-3 facilita una alta separación de compuestos no polares. La tecnología de unión en múltiples pasos garantiza una fase totalmente encapada, estable en condiciones de pH básico. C18-3 es una fase excelente para la separación de fármacos básicos hasta un pH de 12.
Química Octadecilo, C18
USP L1
Partícula (μm) 3, 5
Poro (Å) 100
Área Superficial (m2/g) 425
Pre-Tratamiento –
Funcionalización Mono-Funcional
Carga Carbono (%) 22
Bloqueo Terminal Multi-Estapa
Rango pH 1-12
Modo Inverso
Presión Máxima (bar) –
Dimensiones 3 μm C18-3 5 μm C18-3
25 x 2.1 mm US3C183-025/021 – – –
30 x 2.1 mm US3C183-030/021 – – –
50 x 2.1 mm US3C183-050/021 US5C183-050/021
75 x 2.1 mm US3C183-075/021 US5C183-075/021
100 x 2.1 mm US3C183-100/021 US5C183-100/021
125 x 2.1 mm US3C183-125/021 US5C183-125/021
150 x 2.1 mm US3C183-150/021 US5C183-150/021
250 x 2.1 mm  – – – US5C183-250/021
25 x 3.0 mm US3C183-025/030  – – –
30 x 3.0 mm US3C183-030/030 – – –
50 x 3.0 mm US3C183-050/030 US5C183-050/030
75 x 3.0 mm US3C183-075/030 US5C183-075/030
100 x 3.0 mm US3C183-100/030 US5C183-100/030
125 x 3.0 mm US3C183-125/030 US5C183-125/030
150 x 3.0 mm US3C183-150/030 US5C183-150/030
250 x 3.0 mm – – –  US5C183-250/030
30 x 4.0 mm – – – US5C183-030/040
50 x 4.0 mm – – – US5C183-050/040
125 x 4.0 mm US3C183-125/040 US5C183-125/040
150 x 4.0 mm – – – US5C183-150/040
250 x 4.0 mm – – – US5C183-250/040
25 x 4.6 mm US3C183-025/046 US3C183-025/046
30 x 4.6 mm US3C183-030/046 US5C183-030/046
50 x 4.6 mm US3C183-050/046 US5C183-050/046
75 x 4.6 mm US3C183-075/046 US5C183-075/046
100 x 4.6 mm US3C183-100/046 US5C183-100/046
125 x 4.6 mm US3C183-125/046 US5C183-125/046
150 x 4.6 mm US3C183-150/046 US5C183-150/046
250 x 4.6 mm – – – US5C183-250/046
Uptisphere® Strategy™ C18-HQ

Esta fase de uso general sirve para muchas aplicaciones farmacéuticas. Su superficie de 425 m2/g proporciona una excelente capacidad de carga.
Química Octadecilo, C18
USP L1
Partícula (μm) 1.7, 2.2, 3, 5
Poro (Å) 100
Área Superficial (m2/g) 425
Pre-Tratamiento –
Funcionalización Mono-Funcional
Carga Carbono (%) 19
Bloqueo Terminal Multi-Estapa
Rango pH 1-10
Modo Inverso
Presión Máxima (bar) –
Dimensiones 1.7 μm C18-HQ 2.2 μm C18-HQ 3 μm C18-HQ  5 μm C18-HQ 
25 x 2.1 mm US1.7C18HQ-025/021 US2.2C18HQ-025/021 US3C18HQ–025/021  – – – 
30 x 2.1 mm US1.7C18HQ-030/021 US2.2C18HQ-030/021 US3C18HQ–030/021  – – – 
50 x 2.1 mm US1.7C18HQ-050/021 US2.2C18HQ-050/021 US3C18HQ-050/021  US5C18HQ-050/021 
75 x 2.1 mm US1.7C18HQ-075/021 US2.2C18HQ-075/021 US3C18HQ-075/021  US5C18HQ-075/021 
100 x 2.1 mm US1.7C18HQ-100/021 US2.2C18HQ-100/021 US3C18HQ-100/021  US5C18HQ-100/021 
125 x 2.1 mm US1.7C18HQ-125/021 US2.2C18HQ-125/021 US3C18HQ-125/021  US5C18HQ-125/021 
150 x 2.1 mm US1.7C18HQ-150/021 US2.2C18HQ-150/021 US3C18HQ-150/021  US5C18HQ-150/021 
250 x 2.1 mm  – – – – – – – – –  US5C18HQ-250/021  
25 x 3.0 mm US1.7C18HQ-025/030 US2.2C18HQ-025/030 US3C18HQ–025/030  – – –  
30 x 3.0 mm US1.7C18HQ-030/030 US2.2C18HQ-030/030 US3C18HQ–030/030  – – –  
50 x 3.0 mm US1.7C18HQ-050/030 US2.2C18HQ-050/030 US3C18HQ-050/030  US5C18HQ-050/030 
75 x 3.0 mm US1.7C18HQ-075/030 US2.2C18HQ-075/030 US3C18HQ-075/030  US5C18HQ-075/030 
100 x 3.0 mm US1.7C18HQ-100/030 US2.2C18HQ-100/030 US3C18HQ-100/030  US5C18HQ-100/030 
125 x 3.0 mm US1.7C18HQ-125/030 US2.2C18HQ-125/030 US3C18HQ-125/030  US5C18HQ-125/030 
150 x 3.0 mm US1.7C18HQ-150/030 US2.2C18HQ-150/030 US3C18HQ-150/030  US5C18HQ-150/030 
250 x 3.0 mm – – –  – – – – – –  US5C18HQ-250/030
30 x 4.0 mm – – – US2.2C18HQ-030/040 – – –  US5C18HQ-030/040 
50 x 4.0 mm – – – US2.2C18HQ-050/040 – – –  US5C18HQ-050/040
125 x 4.0 mm – – – US2.2C18HQ-125/040 US3C18HQ-125/040  US5C18HQ-125/040  
150 x 4.0 mm – – – – – – – – –   US5C18HQ-150/040  
250 x 4.0 mm – – – – – – – – –   US5C18HQ-250/040  
25 x 4.6 mm US1.7C18HQ-025/046 US2.2C18HQ-025/046 US3C18HQ-025/046  US5C18HQ-025/046 
30 x 4.6 mm US1.7C18HQ-030/046 US2.2C18HQ-030/046 US3C18HQ-030/046  US5C18HQ-030/046 
50 x 4.6 mm US1.7C18HQ-050/046 US2.2C18HQ-050/046 US3C18HQ-050/046  US5C18HQ-050/046 
75 x 4.6 mm US1.7C18HQ-075/046 US2.2C18HQ-075/046 US3C18HQ-075/046  US5C18HQ-075/046 
100 x 4.6 mm US1.7C18HQ-100/046 US2.2C18HQ-100/046 US3C18HQ-100/046  US5C18HQ-100/046
125 x 4.6 mm US1.7C18HQ-125/046 US2.2C18HQ-125/046 US3C18HQ-125/046  US5C18HQ-125/046 
150 x 4.6 mm US1.7C18HQ-150/046 US2.2C18HQ-150/046 US3C18HQ-150/046  US5C18HQ-150/046 
250 x 4.6 mm – – – – – – US3C18HQ-250/046 US5C18HQ-250/046 
Uptisphere® Strategy™ C18-RP

C18-RP es una fase adecuada para la separación de compuestos de polaridad media y no polares.
C18-RP muestra una excelente estabilidad mecánica convirtiéndola en una herramienta excelente para la purificación en condiciones ácidas o básicas.
Química Octadecilo, C18
USP L1
Partícula (μm) 1.7, 2.2, 3, 5
Poro (Å) 100
Área Superficial (m2/g) 425
Pre-Tratamiento –
Funcionalización Mono-Funcional
Carga Carbono (%) 16
Bloqueo Terminal Mixto
Rango pH 1.5-8
Modo Inverso
Presión Máxima (bar) –
Dimensiones 2.2 μm C18-RP 3 μm C18-RP 5 μm C18-RP
25 x 2.1 mm US2.2C18RP-025/021 US3C18RP–025/021  US5C18RP–025/021 
30 x 2.1 mm US2.2C18RP-030/021 US3C18RP–030/021  US3C18RP–030/021 
50 x 2.1 mm US2.2C18RP-050/021 US3C18RP-050/021  US5C18RP-050/021 
75 x 2.1 mm US2.2C18RP-075/021 US3C18RP-075/021  US5C18RP-075/021 
100 x 2.1 mm US2.2C18RP-100/021 US3C18RP-100/021  US5C18RP-100/021 
125 x 2.1 mm US2.2C18RP-125/021 US3C18RP-125/021  US5C18RP-125/021 
150 x 2.1 mm US2.2C18RP-150/021 US3C18RP-150/021  US5C18RP-150/021 
250 x 2.1 mm – – – – – –  US5C18RP-250/021  
25 x 3.0 mm US2.2C18RP-025/030 US3C18RP–025/030  – – –  
30 x 3.0 mm US2.2C18RP-030/030 US3C18RP–030/030  – – –  
50 x 3.0 mm US2.2C18RP-050/030 US3C18RP-050/030  US5C18RP-050/030 
75 x 3.0 mm US2.2C18RP-075/030 US3C18RP-075/030  US5C18RP-075/030 
100 x 3.0 mm US2.2C18RP-100/030 US3C18RP-100/030  US5C18RP-100/030 
125 x 3.0 mm US2.2C18RP-125/030 US3C18RP-125/030  US5C18RP-125/030 
150 x 3.0 mm US2.2C18RP-150/030 US3C18RP-150/030  US5C18RP-150/030 
250 x 3.0 mm – – – – – –  US5C18RP-250/030
30 x 4.0 mm US2.2C18RP-030/040 – – –  US5C18RP-030/040 
50 x 4.0 mm US2.2C18RP-050/040 – – –  US5C18RP-050/040
125 x 4.0 mm US2.2C18RP-125/040 US3C18RP-125/040  US5C18RP-125/040  
150 x 4.0 mm – – – – – –   US5C18RP-150/040  
250 x 4.0 mm – – – – – –   US5C18RP-250/040  
25 x 4.6 mm US2.2C18RP-025/046 US3C18RP-025/046  US5C18RP-025/046 
30 x 4.6 mm US2.2C18RP-030/046 US3C18RP-030/046  US5C18RP-030/046 
50 x 4.6 mm US2.2C18RP-050/046 US3C18RP-050/046  US5C18RP-050/046 
75 x 4.6 mm US2.2C18RP-075/046 US3C18RP-075/046  US5C18RP-075/046 
100 x 4.6 mm US2.2C18RP-100/046 US3C18RP-100/046  US5C18RP-100/046
125 x 4.6 mm US2.2C18RP-125/046 US3C18RP-125/046  US5C18RP-125/046 
150 x 4.6 mm US2.2C18RP-150/046 US3C18RP-150/046  US5C18RP-150/046 
250 x 4.6 mm – – – – – – US5C18RP-250/046 

P. Máxima 900 bar Compatible Cores-Shell Bajo Volumen Muerto
Cartuchos Uptisphere® Fase Inversa Modo HILIC Modo Normal
1.7 μm 5 x 2.1mm – 3 unidades UP-RP-1.7-005/021 – – – – – –
1.7 μm 5 x 4.6mm – 3 unidades UP-RP-1.7-005/046 – – – – – –
2.2 μm 5 x 2.1mm – 3 unidades UP-RP-2.2-005/021 UP-HILIC-2.2-005/021 UP-NP-2.2-005/021
2.2 μm 5 x 4.6mm – 3 unidades UP-RP-2.2-005/046 UP-HILIC-2.2-005/046 UP-NP-2.2-005/046
3 μm 5 x 2.1mm – 3 unidades UP-RP-3-005/021 UP-HILIC-3-005/021 UP-NP-3-005/021
3 μm 5 x 4.6mm – 3 unidades UP-RP-3-005/046 UP-HILIC-3-005/046 UP-NP-3-005/046
5 μm 5 x 2.1mm – 3 unidades UP-RP-5-005/021 UP-HILIC-5-005/021 UP-NP-5-005/021
5 μm 5 x 4.6mm – 3 unidades UP-RP-5-005/046 UP-HILIC-5-005/046 UP-NP-5-005/046

Protección frente a contaminación física Compatible con conectores 1/16″ Porosidad 0.5 0 2 μm
Porosidad Código Pack
0.5 μm T50270 10
2.0 μm R21281 10
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UPFP (Ultra Performance FLASH Purification), el Salto Técnológico en Procesos de Purificación de Compuestos

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La Cromatografía FLASH es un método de purificación de compuestos de síntesis que se basa en Cromatografía de Líquidos de Media Presión, a diferencia de los sistemas tradicionales por gravedad en columna  que son mucho más lentos e ineficientes. La Cromatografía FLASH difiere de la cromatografía tradicional en columna básicamente por el mayor tamaño de las partículas del soporte, y en la menor contrapresión generada que no obliga al uso de una fuente de presión para generar el caudal de fase móvil necesario en columna.
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Cómo optimizar una Purificación en FLASH

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Los Métodos de Purificación en Cromatografía FLASH, y especialmente en UPFP (Ultra Performance Flash Purification) se desarrollan, o deberían desarrollarse, con los datos obtenidos en separaciones previas en Cromatografía de Capa Fina (TLC) y seguir los pasos siguientes: Generar una mezcla binara que permita que los compuestos de interés estén comprendidos entre Rf 0.15 y Rf 0.35 para una separación óptima. Optimizar la separación modificando la fuerza y/o la selectividad del eluyente. Aumentar la velocidad transformando un método Isocrático a Gradiente
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