Hasta hace pocos años los equipos destinados a purificaciones mediante Cromatografía de Baja Presión (FLASH) se diseñaban con el objetivo de ser simples y, en cierta medida, lo más económicos posible. El corazón del sistema es una bomba de muy alto caudal y baja presión.
La Cromatografía FLASH es un método de purificación de compuestos de síntesis que se basa en Cromatografía de Líquidos de Media Presión, a diferencia de los sistemas tradicionales por gravedad en columna que son mucho más lentos e ineficientes.
La Cromatografía FLASH difiere de la cromatografía tradicional en columna básicamente por el mayor tamaño de las partículas del soporte, y en la menor contrapresión generada que no obliga al uso de una fuente de presión para generar el caudal de fase móvil necesario en columna.
Los solventes en HPLC se utilizan como:
Fases Móviles
Para disolver la muestra
Para preparar las muestras
El uso como Fases Móviles es de principal importancia puesto que sus propiedades han de mantenerse en límites estrechos de aceptabilidad. Además esas propiedades también influyen en la elección del solvente de disolución y el de preparación de la muestra.
La particularidad de un Detector Evaporativo por Dispersión de Luz (Evaporative Light Scattering Detector ELSD) es de ser universal: el 100% de los compuestos no volátiles y semi-volátiles se detectan como carbohidratos, péptidos, aminoácidos, azúcares (polisacáridos, oligosacáridos) PEG’s, proteínas a diferencia de un detector ampliamente usado como el UV que detecta sólo compuestos que tengan un grupo cromóforo.
Las Columnas Monolito Interchim® Peptides son Columnas FLASH preempacadas con un nuevo gel de sílice para Cromatografía de Fase Inversa que permite la purificación de péptidos y proteínas a alta velocidad con muy poca pérdida de carga.
Las Sílices que se usan en Cromatografía Líquida, se dividen en dos categorías principales: Sílices de partícula irregular y Sílices de partícula esférica. Mientras que las primeras se siguen usando ampliamente en el campo de la Cromatografía Flash o en purificaciones a escala industrial, las últimas son el estándar absoluto en análisis por (U)HPLC.
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