Smart Digest Kits

  • Thermo Scientific™ SMART Digest™ Kits

    Kits diseñados para caracterización y cuantificación de biomarcadores y productos bioterapéuticos.

Thermo Scientific™ SMART Digest™ Kits

Kits diseñados para caracterización y cuantificación de biomarcadores y productos bioterapéuticos. Estos kits ofrecen preparación de proteínas de modo:

  • Rápido
  • Simple
  • Altamente reproducible
  • Sensible
  • Automatizable

Los kits SMART Digest™ mejoran los flujos de trabajo gracias a una digestión de proteínas de forma rápida y eficiente en aplicaciones de caracterización y cuantificación, gracias al diseño de tripsina inmovilizada termoestable.

Los protocolos actuales de preparación de muestras para la digestión de proteínas son multifacéticos y
laboriosos. Sin una solución única, el proceso es susceptible a que ocurran errores. Por lo tanto, los
el protocolo general está sujeto a la irreproducibilidad y a un tiempo significativo de procesamiento de muestras.
El kit SMART Digest™ supera estas barreras proporcionando un proceso integrado de implementación simple, (ver el diagrama a continuación), que proporciona una alta confianza en los datos y una reproducibilidad significativamente mayor. Todo el protocolo se puede automatizar fácilmente para procesado de alto rendimiento.

Digestión rápida

El proceso SMART Digest™ no solo es simple, sino que reduce significativamente el tiempo desde la preparación de la muestra hasta el análisis.

En general, en menos de 60 minutos, dependiendo de la complejidad de la muestra, se logra una digestión completa.

En el siguiente ejemplo, se puede ver que la anhidrasa carbónica se somete a una digestión completa en menos de 5 minutos, ya que el pico de ya no está presente a los 5 minutos ya no está presente, y en cromatogramas posteriores, no aparecen más picos tras digestiones más largas.

Los tiempos de digestión optimizados de algunas proteínas comunes se muestran en la tabla adyacente. Para proteínas retenidas con enlaces disulfuro, se puede agregar TCEP 5 mM para ayudar a la digestión.

Reproducibilidad de la digestión

El kit SMART Digest™ proporciona mejoras significativas en reproducibilidad sobre los protocolos existentes, que resulta en menos fallos de muestra, mayor rendimiento y la capacidad de interpretar más
fácilmente los datos.

Con el kit SMART Digest™ se obtienen resultados reproducibles, usuario a usuario, día a día y laboratorio a laboratorio.

El cromatograma ultravioleta (UV) muestra superposiciones de tres Digestiones SMART del mismo anticuerpo monoclonal (mAb), realizado por tres operadores individuales, con RSD en el tiempo de retención
de 0,024%.

Cuantificación

El kit SMART Digest™ permite la detección segura de biomarcadores con alta sensibilidad dentro de un amplio rango dinámico, como se puede ver en el ejemplo de la tiroglobulina.

Se alcanza una sensibilidad mayor en 3,5 horas en comparación con una solución protocolo de digestión que tarda 20 horas en completarse.

Blog…

Separación de Agregados por Cromatografía de Exclusión (SEC)

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Los mAbs producidos por cultivos celulares de mamíferos pueden contener cantidades significativas de dímeros y agregados de mayor orden. Los estudios muestran que esos agregados presentes en drogas pueden inducir una respuesta superior pero pueden también causar severas reacciones inmunogéncas y anafilácticas. Por esta razón las empresas biofarmacéuticas necesitan desarrollar métodos analíticos para controlar la heterogeneidad de tamaño y controlar los niveles de dímeros y otros agregados mayores.

Análisis de Glicanos por Cromatografía de Modo Mixto (MMC) y Cromatografía de Interacción Hidrofílica (HILIC)

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La glicosilación es una de las Modificaciones Post-Translacionales (PTM’s) que más afectan al desarrollo de una proteína terapéutica. La mayoría de las proteínas candidatas en el desarrollo clínico y preclínico como las proteínas recombinantes y los anticuerpos monoclonales (mAb’s) son derivados glicosilados y su actividad biológica depende muchas veces de la estructura y tipo de los glicanos unidos a esas proteínas.

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laboriosos. Sin una solución única, el proceso es susceptible a que ocurran errores. Por lo tanto, los
el protocolo general está sujeto a la irreproducibilidad y a un tiempo significativo de procesamiento de muestras.
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Columnas para Oligonucleótidos Thermo Scientific™: Especificaciones Generales

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