¿Por qué preferir una Sílice Esférica a una Sílice Irregular para optimizar las purificaciones por Cromatografía FLASH?
La Purificación por Cromatografía Líquida es siempre un reto y muchas veces es el resultado de un compromiso entre la pureza obtenida, la carga de la muestra y la velocidad deseada.
Para mejorar la eficacia para obtener compuestos más puros, el químico ha de encontrar el mejor equilibrio entre la pureza, la duración del método y las consideraciones ambientales. Este delicado equilibrio también resulta necesario tanto para los productos crudos como para la purificación final.
El concepto UPFP, Ultra Performance Flash Purification, permite trabajar con un caudal más elevado y, en consecuencia, reducir el tiempo y el coste por muestra y todo con una mayor eficacia.La diferencia entre el concepto UPFP y la cromatografía FLASH tradicional, resulta de la combinación de una tecnología instrumental de altas prestaciones y del control experto de partículas esféricas de sílice de pequeño tamaño en las columnas puriFlash®, que ofrece ventajas significativas frente a sílice tradicional de calidad Flash.
La columna puriFlash®: la herramienta de separación
La selección del soporte ha de tener en cuenta el volumen de la muestra, la naturaleza del analito y su concentración y de las propiedades intrínsecas del material adsorbente.
Tanto la sílice cruda como la modificada son soportes rígidos que no se contraen o se hinchan con los solventes.
Una mayor selectividad permite una mayor capacidad de la columna y una mayor productividad
La superficie de este tipo de soporte puede modificarse fácilmente, hecho que crea un gran potencial para la purificación gracias a interacciones de tipo hidrofóbico e hidrofílico que permiten obtener una mayor selectividad.
Sin embargo la estabilidad de estos soportes modificados es limitada frente al pH, normalmente entre 2 y 7.5, frente a eluyentes acuosos o la temperatura.
Es, por este motivo, que una amplia variedad de sílices modificadas resulta esencial para poder satisfacer el proceso de purificación más exigente.
Gracias a la sílice esférica Ultra-pura de las columnas puriFlash®, se obtiene una mayor reproducibilidad y purificaciones optimizadas de crudos.
¿Qué beneficios se obtienen de sílices de menor granulometría?
Se ha comparado la purificación de dos colorantes alimentarios obtenida en columnas estándar de sílice irregular y en una columna puriFlash® de 15 μm.
1. Primera purificación : Sílice irregular de 50 µm. Columna de 12 g (Ref.: IR-50SI / 12g)
Purificación de colorantes alimentarios en Columna Estándar (Sílice Irregular)
De las imágenes se puede constatar:
- Poca separación entre los compuestos amarillo y azul, que indica una capacidad de carga baja.
- Los colorantes eluyen en bandas muy anchas, que implica un gran volumen recolectado.
2. Segunda purificación: sílice esférica de 15 µm – 12 g (Ref: PF-15SIHP / 12g) con las mismas condiciones.
Sílice Esférica de 15 um, Menor tiempo de análisis, menor volumen de recolección.
Se evidencian grandes diferencias:
- La imagen 3 muestra que cuando el compuesto amarillo eluye de la columna, el azul se encuentra todavía en cabeza de columna, y que prácticamente toda la longitud del lecho de la columna está disponible. Es posible aceptar más productos: la capacidad mejora considerablemente.
- La imagen 4 muestra una banda muy estrecha del compuesto azul indicando una alta concentración del mismo: menor volumen colectado y menor tiempo de eliminación del eluyente.
- El tiempo de análisis se reduce de 6 a 5 minutos.
3. Tercera purificación: optimización de las condiciones de gradiente. Se obtiene una reducción del tiempo necesario de 6 a 2 minutos, manteniendo una resolución satisfactoria y un menor volumen de recolección.
Como consecuencia de la mayor eficacia se puede modificar el gradiente para obtener una mayor velocidad de purificación.
Conclusión:
El uso de partículas pequeñas en procesos de purificación permite:
- Superior resolución
- Mayor capacidad de carga de la columna
- Purificaciones más rápidas
- Menores volúmenes de recolección
- Menor tiempo de evaporación
Para más información :
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